Publicado

2005-01-01

Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1

Implementation of a fluorometric method for the anti HIV-1 virus reverse transcriptase activity evaluation

Palabras clave:

VIH-1 - Transcriptasa reversa - SIDA - cDNA - Retrotranscripción, Cy3 (es)
HIV-1 - Reverse Transcriptase - AIDS - cDNA - Retrotranscription, Cy3. (en)

Descargas

Autores/as

  • Carolina Wilches Arciniegas
  • Claudia Patricia Cordero Camacho
  • Fabio Ancizar Aristizabal Gutierrez
Se implementó una prueba de tamizaje preliminar para evaluar la potencial inhibición ejercida por productos de origen natural y sintético sobre la actividad de la proteína Transcriptasa Reversa del virus VIH-1, en respuesta a la necesidad de disponer de un ensayo in vitro no radioactivo, relativamente rápido, que arroje resultados válidos, con costos moderados, bioseguro y de fácil acceso. Esta prueba se basa en la capacidad que tiene la proteína transcriptasa reversa viral para formar DNA de cadena sencilla (cDNA) a partir de RNA, utilizando deoxinucleótidos trifosfatados (dNTPs), proceso conocido como transcripción reversa. Para detectar la actividad de la proteína se realizaron ensayos fluorométricos in vitro, usando proteína recombinante sin purificar, y nucleótidos fluorescentemente marcados (Cy3-dCTP) como parte del sustrato. Las condiciones establecidas para la actividad de la proteína fueron 5µg/reacción de RNA total y 2µg/reacción de oligo-dT12-18, reflejadas en 43.6% de incorporación del nucleótido fluoromarcado

A preliminary screening test to asses the potential of natural and synthetic products to inhibit the HIV-1 reverse transcriptase activity was implemented. This method is a response to the need of an in vitro, non radioactive, easy, biosafety and rapid test, with reliable results and accesible to our laboratories. This test is based on the ability of the viral reverse trascriptase (RT) of synthesize single strand DNA (cDNA) from a RNA strand, using triphosphate deoxynucleotides (dNTPs), process known as reverse transcription. In order to detect the enzyme activity in vitro fluorometric assays were carried out, with unpurified recombinant protein and fluorescently marked nucleotides as part of the substrate (Cy3-dCTP). Conditions for the protein activity were established at 5µg/reaction of total RNA and 2µg/reaction of oligo-dT12-18, which gave a 43.6% of incorporation of fluorescent nucleotide (Cy3-dCTP).

Cómo citar

APA

Wilches Arciniegas, C., Cordero Camacho, C. P. y Aristizabal Gutierrez, F. A. (2005). Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1. Revista Colombiana de Ciencias Químico-Farmacéuticas, 34(1). https://revistas.unal.edu.co/index.php/rccquifa/article/view/1633

ACM

[1]
Wilches Arciniegas, C., Cordero Camacho, C.P. y Aristizabal Gutierrez, F.A. 2005. Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1. Revista Colombiana de Ciencias Químico-Farmacéuticas. 34, 1 (ene. 2005).

ACS

(1)
Wilches Arciniegas, C.; Cordero Camacho, C. P.; Aristizabal Gutierrez, F. A. Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1. Rev. Colomb. Cienc. Quím. Farm. 2005, 34.

ABNT

WILCHES ARCINIEGAS, C.; CORDERO CAMACHO, C. P.; ARISTIZABAL GUTIERREZ, F. A. Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1. Revista Colombiana de Ciencias Químico-Farmacéuticas, [S. l.], v. 34, n. 1, 2005. Disponível em: https://revistas.unal.edu.co/index.php/rccquifa/article/view/1633. Acesso em: 29 mar. 2024.

Chicago

Wilches Arciniegas, Carolina, Claudia Patricia Cordero Camacho, y Fabio Ancizar Aristizabal Gutierrez. 2005. «Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1». Revista Colombiana De Ciencias Químico-Farmacéuticas 34 (1). https://revistas.unal.edu.co/index.php/rccquifa/article/view/1633.

Harvard

Wilches Arciniegas, C., Cordero Camacho, C. P. y Aristizabal Gutierrez, F. A. (2005) «Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1», Revista Colombiana de Ciencias Químico-Farmacéuticas, 34(1). Disponible en: https://revistas.unal.edu.co/index.php/rccquifa/article/view/1633 (Accedido: 29 marzo 2024).

IEEE

[1]
C. Wilches Arciniegas, C. P. Cordero Camacho, y F. A. Aristizabal Gutierrez, «Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1», Rev. Colomb. Cienc. Quím. Farm., vol. 34, n.º 1, ene. 2005.

MLA

Wilches Arciniegas, C., C. P. Cordero Camacho, y F. A. Aristizabal Gutierrez. «Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1». Revista Colombiana de Ciencias Químico-Farmacéuticas, vol. 34, n.º 1, enero de 2005, https://revistas.unal.edu.co/index.php/rccquifa/article/view/1633.

Turabian

Wilches Arciniegas, Carolina, Claudia Patricia Cordero Camacho, y Fabio Ancizar Aristizabal Gutierrez. «Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1». Revista Colombiana de Ciencias Químico-Farmacéuticas 34, no. 1 (enero 1, 2005). Accedido marzo 29, 2024. https://revistas.unal.edu.co/index.php/rccquifa/article/view/1633.

Vancouver

1.
Wilches Arciniegas C, Cordero Camacho CP, Aristizabal Gutierrez FA. Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1. Rev. Colomb. Cienc. Quím. Farm. [Internet]. 1 de enero de 2005 [citado 29 de marzo de 2024];34(1). Disponible en: https://revistas.unal.edu.co/index.php/rccquifa/article/view/1633

Descargar cita

Visitas a la página del resumen del artículo

310

Descargas

Los datos de descargas todavía no están disponibles.