El estudio se realizó entre julio y diciembre de 2016 en las instalaciones del Laboratorio de Crianza y Control de Plagas de especies forestales del Instituto de Investigaciones de la Amazonía Peruana - IIAP, ubicado en el distrito de Morales, región de San Martín, con coordenadas UTM: 9283654 Norte y 0347742 Este, a 332 m.s.n.m.

El clima de la Región, según la clasificación de Werren Thornthwaite, es tropical húmedo con lluvia abundante en todas las estaciones del año, con una precipitación pluvial de 1478 mm, humedad relativa de 77%, temperatura de 23,9 °C y velocidad del viento de 3.2 km/h (SENAMHI, 2016).

La resina fue recolectada de plantaciones jóvenes de 3.5 años de edad en el distrito de Cacatachi, región San Martín. Para uniformizar la calidad se tuvieron en cuenta: la fase lunar (cuarto menguante), la arquitectura de la planta (tipo cónico), la hora de recolección de muestras (5 - 8 a.m.) y la parte vegetativa (ramas y hojas de la copa) (Figura 1).

Figura 1

Se utilizaron hojas de S. macrophylla producidas por semillas, provenientes de un árbol semillero de 16 años de edad, establecido en la estación expe rimental del IIAP. Para la producción de plantas fue utilizado sustrato de tierra agrícola, cascarilla de arroz carbonizada y humus de lombriz en pro porciones iguales. Las plantas fueron producidas bajo diferentes gradientes de sombra (sombra (%) /días) 80/comienzo, 60/20, 45/60, 45/pleno sol, hasta completar 90 días, con el fin de aclimatarlas antes de ser plantadas en campo. Después de este periodo, las plantas presentaron en promedio 35 cm de altura y 4 mm de diámetro basal (Figura 2A), adicionalmente fueron irrigadas con microas- persión cada 8 h por un periodo de 15 minutos.

De otro lado, se utilizaron larvas de H. grandella, en instar III (Figura 2B), procedentes de insectos madres recolectados de diferentes plantaciones juveniles de caoba y cedro (Cedrela odorata) con alta infestación de la plaga, de acuerdo con la metodología propuesta por Mancebo et al. (2002).

Figura 2

Finalmente las larvas fueron mantenidas y alimentadas con dieta natural consistente en hojas tiernas de caoba, en condiciones controladas de laboratorio e invernadero por un periodo de 42 días, hasta alcanzar el estadio adecuado (Instar III) para iniciar el estado de larvas antes de ser utilizadas en el ensayo.

Los tratamientos fueron dispuestos en un Diseño Completamente al Azar (DCA), en esquema de parcelas subdivididas, con cinco tratamientos, tres repeticiones y 10 discos foliares por unidad experimental, donde las parcelas consistieron en las concentraciones de resina de J. curcas: T1: 0%; T2: 10%; T3: 20%; T4: 30%; y T5: 40% y las subparcelas en cuatro tiempos de evaluación cada 6 horas durante el día (6, 12, 18 y 24h).

Las concentraciones de los tratamientos fueron preparadas utilizando la resina cruda de J. curcas, por ej., para el tratamiento 10% se agregaron 100 ml de biocida en 900 ml de agua destilada para obtener un volumen deseado (1 litro). Posteriormente, en envases de vidrio de 30 ml fueron colocados los discos foliares de 12.5 mm² obtenidos de la tercera hoja numerada desde la parte apical hacia la basal de las plantas de S. macrophylla. Estos discos fueron recortados con la ayuda de un sacabocado antes de colocar las larvas de H. grandella para ser monitoreadas durante un periodo 24 h, de acuerdo con la metodología propuesta por Mancebo et al. (2002).

Las evaluaciones fueron realizadas cada 6 h diarias durante un periodo de 15 días y consistieron en: consumo del disco foliar -CDF(%), incremento de consumo foliar-ICF(%), sobrevivencia de larvas-SL(%), mortandad de larvas -ML(%), número de orificios foliares-NOF y actividad larval-AL(%). Durante este periodo se tomaron registros de clima como temperatura (°C) y humedad relativa (%).

Los datos obtenidos fueron sometidos a análisis de varianza (Anova) y las medias de los datos cuantitativos fueron analizadas mediante regresión polinomial (p < 0.05) utilizando el programa Sisvar (Ferreira, 2014).

En la Figura 3 se observa que, la relación entre el tiempo de evaluación y las concentraciones de resina fue inversamente lineal (P < 0.05) para el porcentaje de consumo de discos foliares (%) por larvas de H. grandella . El incremento de las concentraciones de resina redujo el consumo foliar por la plaga, así, en la concentración de 40% fue afectado sólo 18% del follaje, por el contrario, en el testigo el consumo fue > 63%, igualmente se observó un aumento en el consumo foliar a través de las horas de evaluación, iniciando con 18.38% a las 6 horas y llegando a su punto máximo a las 24 horas con 64%.

El porcentaje de consumo de discos foliares indica que la resina de J. curcas en concentraciones > 10% posee potencial insecticida natural y controla de manera eficiente el daño en las hojas de S. macrophylla ; en consecuencia, este producto, por su acción rápida, es una alternativa natural altamente degradable en el medio ambiente lo que reduce el impacto sobre organismos benéficos y los efectos tóxicos sobre mamíferos (Rondelli, 2010).

Figura 3

El incremento del consumo foliar durante el tiempo de evaluación presentó tendencias lineales y cuadráticas (P < 0.05) con excepción de las concentraciones 20% y 40%, que presentaron comportamientos similares no significativos en las 24 horas de evaluación (Figura 4).

Figura 4

El número de orificios o daño foliar en las hojas expuestas a larvas de H. grandella presentó una tendencia cuadrática para todas las concentraciones de J. curcas , no obstante solo fue significativa para las concentraciones 30% y 40% (Figura 5). Estos resultados muestran que las concentraciones hasta 20% de J. curcas, además de reducir el número de orificios foliares, presentaron un efecto constante durante las 24 horas de evaluación. Se observó, también, que las larvas expuestas a las concentraciones 30% y 40%, produjeron un número mayor de orificios foliares a partir de 13 horas desde el comienzo del ensayo, con un máximo de 10 orificios.

Figura 5

El número de orificios foliares y el tamaño de estos son contradictorios, el menor número ocurrió en el testigo (sin resina) y el mayor en la concentración 40% de resina. No obstante, el efecto de la resina se observa mejor en el diámetro de los orificios, así, mientras que en el testigo fue de 17.6 mm, en la concentración de 40% fue 4.06 mm, después de 24 horas de evaluación.

La sobrevivencia y la mortalidad de larvas presentaron un comportamiento lineal (P > 0.05) para el testigo y cuadrático (P < 0.05) para las demás concentraciones de J. curcas durante las 24 horas de evaluación. En la concentración de 40% de resina de J. curcas se observó mayor mortalidad de larvas a partir de 17 horas, alcanzando al final de la evaluación un valor máximo de 67% (Figura 6). Cuando no se aplicó resina en el control de larvas éstas presentaron una sobrevivencia de 100% al final de 24 horas de evaluación (Figura 7).

Figura 6

Figura 7

Los porcentajes de mortalidad y sobrevivencia de larvas de H. grandella por efecto de la resina de J. curcas fueron superiores a los encontrados por Holtz et al. (2016), quienes observaron una mortalidad de 49% en Planococcus citri (plaga del café -Coffea arabica L.), igualmente fueron superiores a los resultados encontrados por Bezerra et al. (2014) al trabajar en el control de larvas de A. aegypti (50%) en instar III con resina de J. curcas. El efecto insecticida de esta resina se atribuye a la presencia elevada de compuestos terpenicos y saponinas en el extracto. Gonçalves et al. (2009) afirman que la presencia de esteres diterpenos en J. curcas es uno de los componentes más letales para los seres vivos.

Según Schenkel et al. (2007) las saponinas son sustancias que poseen actividad antifúngica y antibactericida capaces de romper la membrana celular de los microorganismos haciendo posible que otras sustancias contenidas en los bioinsecticidas penetran con mayor facilidad, provocando la muerte del insecto plaga. De acuerdo con esta afirmación, en el presente estudio las larvas de H. grandella murieron por contacto con la piel y posterior ingreso de la resina a través de las vías respiratorias, además del consumo de las hojas de S. macrophylla. Resultados similares fueron observados por Holtz et al. (2016) al aplicar extractos de J. curcas sobre P. citri en plantas de café. Isman (2006) encontró que la acción de los bioinsecticidas es más rápido por contacto que por consumo debido a que el proceso de digestión retarda la acción de estos. Según Gonçalves et al. (2009) los extractos de J. curcas actúan en el sistema nervioso central del insecto impidiendo la transmisión de los impulsos nerviosos debido a la inhibición de la enzima acetil colinesterasa o por disturbios en la acetilcolina y en los canales de Na+ y K+. Además afecta la respiración celular y paraliza el transporte de electrones y/o inhibidores de la síntesis de ATP.

Con excepción de la concentración de 10% de resina, que mostró una tendencia lineal (P > 0.05) (Figura 8), la actividad larval (%) presentó una tendencia cuadrática (P < 0.05) para todas las concentraciones evaluadas. Por otra parte, se observó que las larvas en el tratamiento sin resina (testigo) presentaron mayor actividad durante el tiempo de monitoreo, hasta alcanzar su punto máximo de 80% a 17 horas de evaluación. En la misma Figura 8 se observa que en la concentración de resina de 10% la actividad larval fue alta y constante durante 24 horas de evaluación con un promedio de 61.9%, lo que indica que las concentraciones bajas no disminuyen el ataque de larvas de H. grandella en las hojas de S. macrophylla. Por otra parte, se observó que en la concentración de 20% ocurrió una alta actividad larval (78%) en las primeras horas de evaluación, para posteriormente disminuir hasta 20% a 15 horas; no obstante a partir de esta hora la actividad larval aumentó, por tanto, se puede afirmar que la acción insecticida de esta concentración no fue suficiente para disminuir la severidad de H. grandella. En las concentraciones de 30% y 40% la actividad larval disminuyó durante el periodo de evaluación.

En Laboratorio se observó que la actividad larval (%) o locomoción de las larvas en el tratamiento testigo fue siempre constante a través de contracciones del cuerpo y las reacciones al contacto con un pincel. Por el contrario, las larvas bajo concentraciones altas de resina presentaron reducción en sus movimientos después de 6 horas de aplicados los tratamientos hasta llegar al estado inactivo a 24 horas de exposición. Resultados similares obtuvieron Bezerra et al. (2014) trabajando con extractos de hojas y ramas de J. curcas en el control de larvas de A. aegypti. Igualmente Botti et al. (2015) trabajando con diferentes concentraciones y diferentes plantas biocidas (A. indica, C. frutescens y el aceite de J. curcas -3%), determinaron que el aceite de semillas de J. curcas presentó una mayor mortalidad (60%) del pulgón (Brevicoryne brassicae) en las primeras 24 horas.

Figura 8