ELISA para la identificación de los patrones alimentarios de Triatominae en Colombia

Using ELISA for identifying Triatominae feeding behaviour in Colombia

Objetivo. Estandarizar la técnica de ELISA para la identificación de los patrones alimentarios de insectos triatominos.
Métodos. Para estandarizar el ELISA se prepararon 12 antisueros policlonales anti-especie animal a partir de inmunizaciones en conejos con sueros de animales domésticos y silvestres, que fueron titulados y absorbidos para mejorar especificidad; como controles positivos se utilizaron contenidos intestinales de ninfas de V instar de Rhodnius prolixus previamente alimentadas sobre cada hospedero; los negativos se obtuvieron de triatominos sin alimentar. Se procesaron 60 contenidos intestinales de R. prolixus de intradomicilio colectados en campo para determinar la efectividad de la prueba.
Resultados. Se estandarizó la técnica de ELISA con alta reactividad en la detección de cada proteína sanguínea de los controles positivos utilizados. En el 70 % de los contenidos intestinales de los triatominos colectados en el domicilio se detectaron proteínas sanguíneas de uno o más hospederos domésticos y silvestres. Sangre de ave, humano, cerdo y cabra fueron las fuentes alimentarias más frecuentes; proteínas sanguíneas de animales silvestres fueron identificadas en 9,5 %.
Conclusiones. La técnica mostró ser efectiva en la detección de proteínas sanguíneas de diferentes hospederos en el contenido intestinal de triatominos de laboratorio y de campo. Si bien se determinó preferencialmente sangre de animales domésticos, el hallazgo de sangre de animales silvestres podría indicar movilidad de insectos probablemente de origen silvestre al domicilio. Esta herramienta ayuda a entender el comportamiento de los triatominos frente a sus hospederos, contribuyendo a la comprensión de la ecoepidemiología de la Enfermedad de Chagas.

Objective. Standardising the ELISA technique for identifying triatomine insects' feeding behaviour.
Methods. The ELISA test was standardised by preparing 12 animal anti-specie polyclonal antisera by immunising rabbits with sera from domestic and wild animals; the sera were titred and absorbed to improve specificity. The intestinal content of fifth-instar Rhodnius prolixus (previously fed on each host) was used as positive control; negative controls were obtained from triatomines without feeding. The intestinal content from 60 intradomicile R. prolixus collected in the field was processed to determine the test's effectiveness.
Results. The high-reactivity ELISA technique was standardised in detecting every blood protein in the positive controls used here. Blood proteins from one or more domestic and wild hosts were detected in 70% of the intestinal content of triatomines collected in homes. Bird, human, pig and goat blood were the most frequent feeding sources; blood proteins from wild animals were identified in 9.5% of them.
Conclusions. The technique was shown to be effective in detecting blood proteins from different hosts in the intestinal content of triatomines taken from the laboratory and the field. Even though domestic animals' blood was preferentially determined, the findings from wild animals' blood could indicate insect mobility probably from the wild to the domicile. This tool helps in understanding triatomines' behaviour regarding their hosts, thereby contributing to understanding Chagas' disease eco-epidemiology.