Antifungal activity of neem (Azadirachta indica: Meliaceae) extracts against dermatophytes
Actividad antifúngica de extractos de neem (Azadirachta indica: Meliaceae) sobre hongos dermatofitos
Palabras clave:
HPLC, neem, microbial sensitivity tests, minimum inhibitory concentration, terpenoids (en)concentración mínima inhibitoria, CLAR, neem, pruebas de sensibilidad microbiana, terpenoides (es)
Descargas
In order to assess the antifungal activity of methanolic extracts from neem tree (Azadirachta indica A. Juss.), several bioassays were conducted following M38-A2 broth microdilution method on 14 isolates of the dermatophytes Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Microsporum canis and Epidermophyton floccosum. Neem extracts were obtained through methanol-hexane partitioning of mature green leaves and seed oil. Furthermore, high performance liquid chromatography (HPLC) analyses were carried out to relate the chemical profile with their content of terpenoids, of widely known antifungal activity. The antimycotic Terbinafine served as a positive control. Results showed that there was total growth inhibition of the dermatophytes isolates at minimal inhibitory concentrations (MIC) between 50 μg/mL and 200 μg/mL for leaves extract, and between 625 μg/mL and 2500 μg/mL for seed oil extract. The MIC of positive control (Terbinafine) ranged between 0.0019 μg/mL and 0.0313 μg/mL. Both neem leaves and seed oil methanol extracts exhibited different chromatographic profiles by HPLC, which could explain the differences observed in their antifungal activity. This analysis revealed the possible presence of terpenoids in both extracts, which are known to have biological activity. The results of this research are a new report on the therapeutic potential of neem to the control of dermatophytosis.
Actividad antifúngica de extractos de neem (Azadirachta indica: Meliaceae) sobre hongos dermatofitos
Se determinó la actividad antifúngica de extractos metanólicos de la especie Azadirachta indica A. Juss. (Meliaceae), conocida comúnmente como neem, empleando el método de microdilución en caldo M38-A2 de referencia para hongos filamentosos y dermatofitos. Se evaluaron 14 aislamientos de los dermatofitos Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Microsporum canis y Epidermophyton floccosum. Los extractos de neem fueron obtenidos mediante partición metanol-hexano a partir de aceite de semillas y hojas verdes maduras. Adicionalmente, se analizaron por cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) con el fin de relacionar su perfil químico con el contenido de terpenoides, de conocida actividad antifúngica. Se empleó como control positivo el antimicótico Terbinafina. Los resultados mostraron inhibición total del crecimiento de los aislamientos de dermatofitos a concentraciones mínimas inhibitorias (CMI) entre 50 μg/mL y 200 μg/mL para el extracto de hojas y entre 625 μg/mL y 2500 μg/mL para el extracto de aceite de semillas. La CMI encontrada para el control positivo (Terbinafina) fluctuó entre 0,0078 μg/mL y 0,0313 μg/mL. Los extractos metanólicos de hojas y aceite de semillas de neem exhibieron diferentes perfiles cromatográficos en CLAR, lo cual podría explicar las diferencias observadas en su actividad antifúngica. Éste análisis químico reveló la posible presencia de compuestos terpenoides en ambos extractos, los cuales se conocen por su actividad biológica. Los resultados de esta investigación son un nuevo aporte sobre el potencial terapéutico del neem para el control de dermatofitosis.
Descargas
Citas
Alvarez MI, Caicedo LD. Dermatofitos en Perros de Cali, Colombia. Biomédica. 2001;21:128-133. Doi: http://dx.doi. org/10.7705/biomedica.v21i2.1100.
CLSI. Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Filamentous Fungi; Approved Standard-Second Edition. Wayne, PA, USA: Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI); 2008. p. 1-23.
Govindachari TR, Suresh G, Gopalakrishnan G, Masilamani S, Banumathi B. Antifungal Activity of Some Tetranortriterpenoids. Fitoterapia. 2000;71:317-320. Doi: 10.1016/S0367-326X(99)00155-0.
Govindachari TR, Suresh G, Masilamani S. Antifungal Activity of Azadirachta indica Leaf Hexane Extract. Fitoterapia. 1999;70:417-420. Doi: 10.1016/S0367-326X(99)00038-6.
Govindachari TR, Suresh G, Gopalakrishnan G, Banumathy B, Masilamani S. Identification of Antifungal Compounds from the Seed Oil of Azadirachta indica. Phytoparasitica. 1998;26(2):109-116.
Jarvis AP, Morgan ED, Edwards C. Rapid Separation of Triterpenoids from Neem Seed Extracts. Phytochem Anal. 1999;10:39-43. Doi: 10.1002/(SICI)1099-1565(199901/02)10:1<39::AID-PCA426>3.0.CO;2-L.
Johnson S, Morgan ED, Peiris CN. Development of the Major Triterpenoids and Oil in the Fruit and Seeds of Neem (Azadirachta indica). Ann Bot. 1996;78:383-388. Doi: 10.1006/anbo.1996.0133.
Kane J, Summerbell R, Sigler L, Krajden S, Land G. Laboratory Handbook of Dermatophytes: A Clinical Guide and Laboratory Handbook of Dermatophytes and Other Filamentous Fungi from Skin, Hair, and Nails. Belmont: Star Publishing Company; 1997. p. 1-50.
Kavitha G, Karuna R, Sashidhar RB. Inhibitory Role of Neem Seed Kernel Extracts and Terpenoids on Growth and Aflatoxin Production by Aspergillus parasiticus (NRRL 2999). Ind J Nat Prod Resour. 2014;5(1):20-33.
Kurekci C, Padmanabha J, Bishop-Hurley SL, Hassan E, Al Jassim RA, McSweeney CS. Antimicrobial Activity of Essential Oils and Five Terpenoid Compounds against Campylobacter jejuni in Pure and Mixed Culture Experiments. Int J Food Microbiol. 2013;166(3):450-457. Doi: 10.1016/j.ijfoodmicro.2013.08.014.
Maoz M, Neeman I. Effect of Inula Viscosa Extract on Chitin Synthesis in Dermatophytes and Candida albicans. J Ethnopharmacol. 2000;71:479-482. Doi: 10.1016/ S0378-8741(00)00187-2.
Nagabhushan, Raveesha KA, Shrisha DL. Antidermatophytic Activity of Eclipta prostrata L. Against Human Infective Trichophyton and Microsporum spp. Int J Chem Anal Sci. 2013;4(2):136-138. Doi: 10.1016/j. ijcas.2013.05.003.
Natarajan V, Venugopal PV, Menon T. Effect of Azadirachta indica (Neem) on the Growth Pattern of Dermatophytes. Ind J Med Microbiol. 2003;21(2):98-101.
Orozco-Sanchez F, Rodriguez-Monroy M, Sepulveda-Jimenez G, Trejo-Tapia G, Zamilpa A. Oxygen Limitations to Grow Azadirachta indica Cell Culture in Shake Flasks. Rev Mex Ing Quím. 2011;10(3):343-352.
Ospina DI, Hoyos RA, Arango M, Orozco F, Ríos JD. Actividad Antifúngica de Extractos de Biomasa Celular de Neem sobre Aislamientos de Dermatofitos. Rev Colomb Biotecnol. 2014;XVI(2):187-193. Doi: https://doi.org/10.15446/rev.colomb.biote.v16n2.38961.
Ospina DI, Alvarez V, Torres HG, Sánchez MS, Bonilla CR. Evaluación in Vitro de la Actividad Inhibitoria de Aceites Esenciales de Lippia origanoides H.B.K. sobre el Desarrollo Micelial y la Formación de Esclerocios de Sclerotium cepivorum Berk. Acta Agron. 2011;60(4):306-311.
Polaquini SRB, Svidzinski TIE, Kemmelmeier C, Gasparetto A. Effect of Aqueous Extract from Neem (Azadirachta indica A. Juss) on Hydrophobicity, Biofilm Formation and Adhesion in Composite Resin by Candida albicans. Arch Oral Biol. 2006;51(6):482-490. Doi: https://doi.org/10.1016/j.archoralbio.2005.11.007.
Rebell G, Taplin D. Dermatophytes, Their Recognition and Identification. Coral Gables, Florida: University of Miami Press; 1979. p. 1-50.
Rodrigues De Barros PM, Ramos Lacerda H, Marsden Lacerda A, Correia Magalhães OM, Pereira Neves R. Epidemiology, Etiology and Clinical Presentation of Dermatophytosis in Pernambuco, 1995-2005. Rev Soc Bras Med Trop. 2007;40(4):484-486.
Rodriguez MV, Sortino MA, Ivancovich JJ, Pellegrino JM, Favier LS, Raimondi MP, et al. Detection of Synergistic Combinations of Baccharis Extracts with Terbinafine against Trichophyton rubrum with High Throughput Screening Synergy Assay (HTSS) Followed by 3D Graphs. Behavior of Some of Their Components. Phytomedicine. 2013;20(13):1230-1239. Doi: 10.1016/j. phymed.2013.06.015.
Song QY, Qi WY, Li ZM, Zhao J, Chen JJ, Gao K. Antifungal Activities of Triterpenoids from the Roots of Astilbemyriantha Diels. Food Chem. 2011;128:495-499. Doi: 10.1016/j.foodchem.2011.03.059.
Suresh G, Narasimhan NS, Masilamani S, Partho RD, Gopalakrishnan G. Antifungal Fractions and Compounds from Uncrushed Green Leaves of Azadirachta indica. Phytoparasitica. 1997;25(1):33-39. Doi: 10.1007/BF02981477.
Licencia
Derechos de autor 2015 Acta Biológica Colombiana

Esta obra está bajo una licencia internacional Creative Commons Atribución 4.0.
1. La aceptación de manuscritos por parte de la revista implicará, además de su edición electrónica de acceso abierto bajo licencia Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 (CC BY NC SA), la inclusión y difusión del texto completo a través del repositorio institucional de la Universidad Nacional de Colombia y en todas aquellas bases de datos especializadas que el editor considere adecuadas para su indización con miras a incrementar la visibilidad de la revista.
2. Acta Biológica Colombiana permite a los autores archivar, descargar y compartir, la versión final publicada, así como las versiones pre-print y post-print incluyendo un encabezado con la referencia bibliográfica del articulo publicado.
3. Los autores/as podrán adoptar otros acuerdos de licencia no exclusiva de distribución de la versión de la obra publicada (p. ej.: depositarla en un archivo telemático institucional o publicarla en un volumen monográfico) siempre que se indique la publicación inicial en esta revista.
4. Se permite y recomienda a los autores/as difundir su obra a través de Internet (p. ej.: en archivos institucionales, en su página web o en redes sociales cientificas como Academia, Researchgate; Mendelay) lo cual puede producir intercambios interesantes y aumentar las citas de la obra publicada. (Véase El efecto del acceso abierto).
