Estudios preliminares para la propagación clonal "in vitro" de mora (Rubus glaucus L.)

Preliminary studies on In Vitro clonal propagation of Blackberry (Rubus glaucus l.)

Con el objeto de obtener in vitro plántulas de mora (Rubus glaucus L.) que permitan adelantar la micropropagación de la especie, se obtuvieron yemas axilares activas de plantas de mora cultivadas en invernadero. Dichos explantes fueron llevados a" tubo de ensayo, despuésde eliminar primordios
foliares más'externos. Se encontró que una inmersión en hipoclorito de sodio al 0,5% por cinco minutos dio el mejor resultado para desinfección: concentraciones y tiempos mayores no promueven supervivencia del explante. En segundotérmino sedefinió el uso del mejor antioxidante, ya que se detectó un proceso de oxidación generalizado desde el inicio del cultivo in vitro. Al probar varios antioxidantes y clases de sustratos se determinó como el mejor antioxidante el ácido ascórbico (100 ppm) adicionado a la solución nutritiva y como mejor sustrato el líquido sobre papel. Se realizaron ensayos con el objeto de obtener un balance hormonal óptimo. Se probó el efecto de Kinetina y la BAP en diferentes concentraciones adicionadas a un medio básico MS suplementado con ANA (0,1 ppm); calificando desarrollo de ptántula, número de follolos y presenciade callo; se determinó la BAP (2ppm) como responsable del mejor resultado. En el siguiente ensayo se probó interacción citoqulninagiberelina; los mejores resultados se obtuvieron
con AG3 (1ppm) y BAP (2ppm). Posteriormente se planteó un ensayo con el objeto de obtener tallos verdaderos y brotes múltiples, para lo cual se quiso probar AlA en interacción con las hormonas anteriormente probadas, con concentraciones de AlA de 0.1 ppm, BAP (2ppm) y AG3 (1ppm) obteniendo como resultado de esta interacción plántulas óptimas para micropropagación. Los datos de la valoración de desarrollo de las plántulas, brotes múltiples, tallo verdadero, número de folíolos, presencia o no de callos, presencia o ausencia de raíces, fueron analizados estadísticamente con base en un diseño completamente al azar y contrastes ortogonales lo que permitió precisar las concentraciones mencionadas. A partir de plántulas en desarrollo se probó enraizamiento directo con IBA (50 ppm) y transplante a sustrato (suelo: arena) obteniendo proliferación de raíces y supervivencia ex vitro de plántulas provenientes de tubo de ensayo. Habiendo obtenido in vitro elongación de tallos verdaderos y vástagos múltiples se continúa con la etapa de micropropagación, con lo cual se espera la obtención masiva de plantas de mora y proyectar futuras investigaciones con base en estos resultados preliminares.

From tissue culture activelygrowing axillary buds of blackberry Rubus glaucus L. has been achieved suitable plants to initiate a micropropagation system. This is the most appropiate method for produce plants in a short period than another method. The explants were grown on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with inositol (100 mg/l), thiamine-HCI (0.4 mg/l) sucrose (30 g/l) and growth regulators. The pH was adjusted to 5.7-5.8 prior to autoclaving. The glass tubes with the medium were sealed and autoclaved for 20 min at 120°C and 20 P.S.I. The explants were desinfected in 0.5% sodium hypoclorite for 5 min and aseptically transferred to test tubes and sealed. The cultures were maintained at day/night temperature of 24°C/28°C under 18 hr of light. Both liquid-paper and agar solidified media were evaluated; the liquid-paper had more advantages. Ascorbic acid (100 mg/l) was added to liquid-paper medium in order to control oxidation. About 8 weeks later, better results on survival and growth were obtained by the addition of benzylaminopurine-BAP (2 ppm), indolacetic acid-AIA (0.1 ppm) and gibberellic acid (1 ppm) to MS medium.