Publicado
Análisis In Silico de la molécula OmcZ presente en los Nanocables Proteicos Conductores de Electricidad en Geobacter sulfurreducens
In Silico Analysis of Electrically Conductive Protein Nanowires in Geobacter spp. and OmcZ Gene in G. sulfurreducens.
DOI:
https://doi.org/10.15446/rev.colomb.biote.v27n1.112409Palabras clave:
bioinformatica, bioelectricidad, nanocables, citocromo c, geobacter (es)bioinformatics, bioelectricity, nanowires, Cytochrome c, gobacter (en)
Descargas
Geobacter sulfurreducens es una bacteria anaerobia y mesófila que utiliza ácidos grasos, alcoholes y compuestos monoaromáticos como sustratos oxidativos, y óxidos de hierro como aceptor de electrones. Se ha demostrado que esta bacteria es eficiente en la generación de electricidad y desempeña un papel importante en el ciclo del carbono y la biorremediación. Se descubrió que este microorganismo produce y transfiere electrones a través de nanocables proteínicos altamente conductores llamados pili; estos pili actúan como conductores metálicos, permitiendo que los microorganismos intercambien electrones con el medio extracelular.
El artículo se centra en el análisis del gen y producto génico de una proteína llamada OmcZ, que desempeña un papel crucial en la transferencia de electrones entre G. sulfurreducens a los electrodos.
En este estudio, se llevaron a cabo varios pasos para investigar las secuencias de la proteína OmcZ en el género Geobacter. Primero, se realizó una búsqueda en UniProt para obtener la secuencia del OmcZ de G. sulfurreducens. Luego, se efectuaron alineamientos de secuencias con el programa BLASTp para identificar microorganismos ortólogos en el NCBI. Se obtuvieron secuencias de 14 especies de Geobacter, las cuales se alinearon múltiples con el software MEGA11. Se construyó un árbol filogenético utilizando MEGA11 y se realizó una prueba de reloj molecular de Tajima. Además, se llevaron a cabo alineamientos y caracterizaciones de la secuencia OmcZ en G. sulfurreducens, incluyendo el análisis de su genoma y la caracterización fisicoquímica de la proteína. Se usó el software RasMol para realizar predicciones y modelamientos de la proteína.
El estudio se centró en el alineamiento de las secuencias de la proteína OmcZ en diferentes especies de Geobacter spp, ya que descubrió que los filamentos conductores de electricidad están compuestos principalmente por OmcZ. Se encontró un nivel bajo de mutaciones y algunas deleciones en las secuencias analizadas. Se identificaron posibles dominios conservados y se encontraron aminoácidos altamente conservados en la mayoría de las secuencias. El análisis filogenético reveló dos clados principales y mostró la relación entre las especies de Geobacter. El reloj molecular indicó que la secuencia de la proteína OmcZ no se comporta estrictamente como un reloj molecular. Se caracterizó el genoma de G. sulfurreducens y se identificó la región específica que codifica la proteína OmcZ. Se realizó una caracterización fisicoquímica de la proteína y se encontró que era estable y contenía grupos hemo. En general, este estudio proporciona una comprensión de los nanocables proteínicos y su importancia en el metabolismo de Geobacter spp., con implicaciones en tecnologías electroquímicas y biorremediación.
Geobacter sulfurreducens is an anaerobic, mesophilic bacterium that uses fatty acids, alcohols and monoaromatic compounds as oxidative substrates, and iron oxides as electron acceptors. This bacterium has been shown to be efficient in electricity generation and plays an important role in carbon cycling and bioremediation. It was found that this microorganism produces and transfers electrons through highly conductive protein nanowires called pili; these pili act as metallic conductors, allowing the microorganisms to exchange electrons with the extracellular medium.
The article focuses on the analysis of the gene and gene product of a protein called OmcZ, which plays a crucial role in electron transfer between G. sulfurreducens to the pili.
In this study, several steps were carried out to investigate the OmcZ protein sequences in the genus Geobacter. First, a UniProt search was performed to obtain the OmcZ sequence of G. sulfurreducens. Then, sequence alignments were performed with the BLASTp program to identify orthologous microorganisms in NCBI. Sequences of 14 Geobacter species were obtained and multiple alignments were performed with MEGA11 software. A phylogenetic tree was constructed using MEGA11 and a Tajima molecular clock test was performed. In addition, OmcZ sequence alignments and characterizations were performed on G. sulfurreducens, including genome analysis and physicochemical characterization of the protein. RasMol software was used to perform protein predictions and modeling.
The study focused on the alignment of OmcZ protein sequences in different species of Geobacter spp, as it found that the electrically conductive filaments are mainly composed of OmcZ. A low level of mutations and some deletions were found in the analyzed sequences. Possible conserved domains were identified and highly conserved amino acids were found in most of the sequences. Phylogenetic analysis revealed two major clades and showed the relationship between Geobacter species. The molecular clock indicated that the OmcZ protein sequence does not behave strictly as a molecular clock. The genome of G. sulfurreducens was characterized and the specific region encoding the OmcZ protein was identified. A physicochemical characterization of the protein was performed and found to be stable and contain heme groups. Overall, this study provides insight into protein nanowires and their importance in the metabolism of Geobacter spp. with implications for electrochemical technologies and bioremediation.
Referencias
Andrés, G., Gómez, H., Alejandro, M., & Olvera, S. (2017). La plurifuncionalidad de las bacterias electrogénicas. Universitarios Potosinos, 211, 4–10.
Battistuzzi, F. U., Filipski, A. J., & Kumar, S. (2011). Molecular Clock: Testing. In eLS. Wiley. https://doi.org/10.1002/9780470015902.a0001803.pub2
Costa, N. L., Clarke, T. A., Philipp, L.-A., Gescher, J., Louro, R. O., & Paquete, C. M. (2018). Electron transfer process in microbial electrochemical technologies: The role of cell-surface exposed conductive proteins. Bioresource Technology, 255, 308–317. https://doi.org/10.1016/j.biortech.2018.01.133
Fu, T., Liu, X., Gao, H., Ward, J. E., Liu, X., Yin, B., Wang, Z., Zhuo, Y., Walker, D. J. F., Joshua Yang, J., Chen, J., Lovley, D. R., & Yao, J. (2020). Bioinspired bio-voltage memristors. Nature Communications, 11(1), 1861. https://doi.org/10.1038/s41467-020-15759-y
Gu, Y., Srikanth, V., Malvankar, N.S., Samatey, F. A. (2021). Cryo-EM structure of OmcZ nanowire from Geobacter sulfurreducens. DOI: 10.2210/Pdb7LQ5/Pdb. https://www.rcsb.org/structure/7LQ5
Holmes, D. E., Bond, D. R., O?Neil, R. A., Reimers, C. E., Tender, L. R., & Lovley, D. R. (2004). Microbial Communities Associated with Electrodes Harvesting Electricity from a Variety of Aquatic Sediments. Microbial Ecology, 48(2), 178–190. https://doi.org/10.1007/s00248-003-0004-4
Inoue, K., Ogura, Y., Kawano, Y., & Hayashi, T. (2018). Complete Genome Sequence of Geobacter sulfurreducens Strain YM18, Isolated from River Sediment in Japan. Genome Announcements, 6(19). https://doi.org/10.1128/genomeA.00352-18
Koichiro Tamura, Glen Stecher, and S. K. (2021). MEGA11: Molecular Evolutionary Genetics Analysis version 11. Molecular Biology and Evolution 38:3022-3027. DOI: https://doi.org/10.1093/molbev/msab120
Liu, X., Ye, Y., Xiao, K., Rensing, C., & Zhou, S. (2020). Molecular evidence for the adaptive evolution of Geobacter sulfurreducens to perform dissimilatory iron reduction in natural environments. Molecular Microbiology, 113(4), 783–793. https://doi.org/10.1111/mmi.14443
Logan, B. E., Rossi, R., Ragab, A., & Saikaly, P. E. (2019). Electroactive microorganisms in bioelectrochemical systems. Nature Reviews Microbiology, 17(5), 307–319. https://doi.org/10.1038/s41579-019-0173-x
Lovley, D. R. (2017). Electrically conductive pili: Biological function and potential applications in electronics. Current Opinion in Electrochemistry, 4(1), 190–198. https://doi.org/10.1016/j.coelec.2017.08.015
Lovley, D. R. (2022a). Microbial nanowires. Current Biology, 32(3), R110–R112. https://doi.org/10.1016/j.cub.2021.12.019
Lovley, D. R. (2022b). Untangling Geobacter sulfurreducens Nanowires. MBio, 13(3). https://doi.org/10.1128/mbio.00850-22
Lovley, D. R., & Walker, D. J. F. (2019). Geobacter Protein Nanowires. Frontiers in Microbiology, 10. https://doi.org/10.3389/fmicb.2019.02078
Malvankar, N. S., & Lovley, D. R. (2014). Microbial nanowires for bioenergy applications. Current Opinion in Biotechnology, 27, 88–95. https://doi.org/10.1016/j.copbio.2013.12.003
Methé, B. A., Nelson, K. E., Eisen, J. A., Paulsen, I. T., Nelson, W., Heidelberg, J. F., Wu, D., Wu, M., Ward, N., Beanan, M. J., Dodson, R. J., Madupu, R., Brinkac, L. M., Daugherty, S. C., DeBoy, R. T., Durkin, A. S., Gwinn, M., Kolonay, J. F., Sullivan, S. A., … Fraser, C. M. (2003). Genome of Geobacter sulfurreducens: Metal Reduction in Subsurface Environments. Science, 302(5652), 1967–1969. https://doi.org/10.1126/science.1088727
Mora Collazos, A., & Bravo Montaño, E. (2017). Isolation of electrogenic microorganisms with potential to reduce hexavalent chromium. Acta Biológica Colombiana, 22(1), 27–36. DOI: https://doi.org/10.15446/abc.v22n1.57189
NCBI. (1995). Geobacter sulfurreducens. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?mode=Info&id=35554&lvl=3&lin=f&keep=1&srchmode=1&unlock
NCBI. (2018). Geobacter sulfurreducens DNA, complete genome. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AP017912.1/
NCBI. (2019). The Genetic Codes. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Utils/wprintgc.cgi?mode=c#SG11
Pirbadian, S., Barchinger, S. E., Leung, K. M., Byun, H. S., Jangir, Y., Bouhenni, R. A., Reed, S. B., Romine, M. F., Saffarini, D. A., Shi, L., Gorby, Y. A., Golbeck, J. H., & El-Naggar, M. Y. (2014). Shewanella oneidensis MR-1 nanowires are outer membrane and periplasmic extensions of the extracellular electron transport components. Proceedings of the National Academy of Sciences, 111(35), 12883–12888. https://doi.org/10.1073/pnas.1410551111
RCSB PDB. (2021). 7LQ5 Cryo-EM structure of OmcZ nanowire from Geobacter sulfurreducens. https://www.rcsb.org/structure/7LQ5
RCSB PDB. (2022). 8D9M Cryo-EM of the OmcZ nanowires from Geobacter sulfurreducens. https://www.rcsb.org/structure/8D9M
Redondo, J. (2018). Microorganismos electrogénicos: células de combustible microbianas. In 26/27: Vol. I. https://ebuah.uah.es/dspace/handle/10017/37227https://ebuah.uah.es/dspace/handle/10017/37227
Richardson, D. J., Butt, J. N., Fredrickson, J. K., Zachara, J. M., Shi, L., Edwards, M. J., White, G., Baiden, N., Gates, A. J., Marritt, S. J., & Clarke, T. A. (2012). The ‘porin-cytochrome’ model for microbe-to-mineral electron transfer. Molecular Microbiology, 85(2), 201–212. https://doi.org/10.1111/j.1365-2958.2012.08088.x
Richter, H., McCarthy, K., Nevin, K. P., Johnson, J. P., Rotello, V. M., & Lovley, D. R. (2008). Electricity Generation by Geobacter sulfurreducens Attached to Gold Electrodes. Langmuir, 24(8), 4376–4379. https://doi.org/10.1021/la703469y
Richter, H., Nevin, K. P., Jia, H., Lowy, D. A., Lovley, D. R., & Tender, L. M. (2009). Cyclic voltammetry of biofilms of wild type and mutant Geobacter sulfurreducens on fuel cell anodes indicates possible roles of OmcB, OmcZ, type IV pili, and protons in extracellular electron transfer. Energy & Environmental Science, 2(5), 506. https://doi.org/10.1039/b816647a
Santoro, C., Arbizzani, C., Erable, B., & Ieropoulos, I. (2017). Microbial fuel cells: From fundamentals to applications. A review. Journal of Power Sources, 356, 225–244. https://doi.org/10.1016/j.jpowsour.2017.03.109
Santos, T. C., Silva, M. A., Morgado, L., Dantas, J. M., & Salgueiro, C. A. (2015). Diving into the redox properties of Geobacter sulfurreducens cytochromes: a model for extracellular electron transfer. Dalton Transactions, 44(20), 9335–9344. https://doi.org/10.1039/C5DT00556F
Sunil A. Patil, Cecilia Hägerhäll, L. G. (2014). Electron transfer mechanisms between microorganisms and electrodes in bioelectrochemical systems. In Advances in Chemical Bioanalysis.
Wang, F., Chan, C. H., Suciu, V., Mustafa, K., Ammend, M., Si, D., Hochbaum, A. I., Egelman, E. H., & Bond, D. R. (2022). Structure of Geobacter OmcZ filaments suggests extracellular cytochrome polymers evolved independently multiple times. ELife, 11. https://doi.org/10.7554/eLife.81551
Wang, F., Gu, Y., O’Brien, J. P., Yi, S. M., Yalcin, S. E., Srikanth, V., Shen, C., Vu, D., Ing, N. L., Hochbaum, A. I., Egelman, E. H., & Malvankar, N. S. (2019). Structure of Microbial Nanowires Reveals Stacked Hemes that Transport Electrons over Micrometers. Cell, 177(2), 361-369.e10. https://doi.org/10.1016/j.cell.2019.03.029
Cómo citar
APA
ACM
ACS
ABNT
Chicago
Harvard
IEEE
MLA
Turabian
Vancouver
Descargar cita
Licencia

Esta obra está bajo una licencia internacional Creative Commons Atribución 4.0.
Esta es una revista de acceso abierto distribuida bajo los términos de la Licencia Creative Commons Atribución 4.0 Internacional (CC BY). Se permite el uso, distribución o reproducción en otros medios, siempre que se citen el autor(es) original y la revista, de conformidad con la práctica académica aceptada. El uso, distribución o reproducción está permitido desde que cumpla con estos términos.
Todo artículo sometido a la Revista debe estar acompañado de la carta de originalidad. DESCARGAR AQUI (español) (inglés).





