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Optimización del crecimiento y la luminiscencia de Vibrio harveyi CBM-992 en función de las concentraciones de nutrientes
Optimization of growth and luminescence of Vibrio harveyi CBM-992 as a function of nutrient concentrations
DOI:
https://doi.org/10.15446/rev.colomb.biote.v27n1.112972Palabras clave:
emisión de luz; crecimiento microbiano; toxicidad; metodología de superficie de respuesta (es)Descargas
La bioluminiscencia es un proceso bioquímico; que ocurre en vertebrados, invertebrados, plantas y bacterias, mediante el cual estos organismos emiten luz. Se han empleado diferentes especies de bacterias en la detección de contaminación ambiental, tanto en aguas como en sedimentos, pues al exponerse ante diferentes agentes tóxicos disminuyen su luminiscencia. En la presente investigación se optimizó el crecimiento y la luminiscencia de la cepa de Vibrio harveyi CBM-992 a partir de la variación de las concentraciones de triptona, extracto de levadura y glicerol en el medio basal LM; mediante el método de superficie de respuesta. Además, en el medio óptimo para la bioluminiscencia, se evaluó su atenuación frente a diferentes concentraciones de HgCl2, K2Cr2O7 y Fe2(SO4)3, mediante un diseño en bloques completamente aleatorizados. El análisis matemático demostró que el valor óptimo de crecimiento y luminiscencia se alcanza a concentraciones de los nutrientes inferiores a las del medio basal LM. En particular, se definió la composición de un medio que garantiza un aumento de la luminiscencia (5.3 %) con una reducción de la concentración de los nutrientes entre un 6-18 %, que permitirá disminuir costos de producción a escalas superiores de fermentación. El análisis de la EC50 frente a tres metales tóxicos evidencia que la nueva formulación del medio no afecta la capacidad de respuesta de Vibrio harveyi CBM-992, con una secuencia de toxicidad: Hg2+ > Cr6+ > Fe3+. Estos resultados constituirán información básica imprescindible para el futuro diseño de un bioensayo para la detección de contaminantes.
Bioluminescence is a biochemical process that occurs in vertebrates, invertebrates, plants, and bacteria by which these organisms emit light. Different species of bacteria have been used to detect environmental contamination, both in water and sediments, because their luminescence decreases when exposed to different toxic agents. In the present investigation, the growth and luminescence of the Vibrio harveyi CBM-992 strain were optimized by varying the concentrations of tryptone, yeast extract and glycerol in the basal LM medium using the response surface methodology. Furthermore, in the optimal medium for bioluminescence, its attenuation against different concentrations of HgCl2, K2Cr2O7 and Fe2(SO4)3 was evaluated using a completely randomized block design. Mathematical analysis showed that the optimum value of growth and luminescence was obtained at nutrient concentrations lower than those of the basal LM medium. In particular, the composition of a medium that guarantees an increase in luminescence (5.3%) was defined, with a reduction of the nutrient concentration between 6-18%, which will allow to reduce the production costs at higher fermentation scales. The analysis of the EC50 against three toxic metals shows that the new formulation of the medium does not affect the response capacity of Vibrio harveyi CBM-992, with a toxicity sequence: Hg2+ > Cr6+ > Fe3+. These results will constitute essential basic information for the future design of a bioassay for the detection of contaminants.
Referencias
Adnan, N. A., Halmi, M. I. E., Gani, S. S. A., Zaidan, U. H., Othman, R., & Shukor, M. Y. A. (2020). Statistical modeling for the optimization of bioluminescence production by newly isolated Photobacterium sp. NAA-MIE. Proceedings of the National Academy of Sciences, India Section B: Biological Sciences, 90, 797-810. DOI: https://doi.org/10.1007/s40011-019-01154-1
Ayangbenro, A. S., & Babalola, O. O. (2017). A new strategy for heavy metal polluted environments: a review of microbial biosorbents. International journal of environmental research and public health, 14(1), 94. doi:10.3390/ijerph14010094
Baumann, P., & Baumann, L. (1981). The marine Gram-negative eubacteria: genera Photobacterium, Beneckea, Alteromonas, Pseudomonas, & Alcaligenes. The Prokaryotes. A handbook on habitats, isolation, & identification of bacteria. Berlin: Springer-Verlag. 1302-1331.
Blanco, M., Pérez-Albaladejo, E., Piña, B., Kušpilić, G., Milun, V., Lille-Langøy, R., . Karlsen, O. A., Goksøyr, A., & Porte, C. (2017). Assessing the environmental quality of sediments from Split coastal area (Croatia) with a battery of cell-based bioassays. Science of the Total Environment, 624, 1640-1648. DOI: https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2017.10.055
Boehler, S., Strecker, R., Heinrich, P., Prochazka, E., Northcott, G. L., Ataria, J. M., Leusch, F. D., Braunbeck, T., & Tremblay, L. A. (2017). Assessment of urban stream sediment pollutants entering estuaries using chemical analysis and multiple bioassays to characterise biological activities. Science of the Total Environment, 593, 498-507. DOI: https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2017.03.209
Chee, B. W., Kheng, L. Y., Ahmad, A., Heng, L. Y., & Surif, S. (2010). The potential of luminescent bacteria Photobacterium leiognathi as a biosensor for the detection of aquatic toxicity. Environ and Natl Res J, 8(3), 1-9.
Cho, J. C., Park, K. J., Ihm, H. S., Park, J. E., Kim, S. Y., Kang, I., Kyu-Ho, L., Deokjin, J., Dong-Hun, L., & Kim, S. J. (2004). A novel continuous toxicity test system using a luminously modified freshwater bacterium. Biosensors and Bioelectronics, 20(2), 338-344. doi:10.1016/j.bios.2004.02.001
Chun, U. H., Simonov, N., Chen, Y., & Britz, M. L. (1996). Continuous pollution monitoring using Photobacterium phosphoreum. Resources, conservation and recycling, 18(1-4), 25-40. DOI: https://doi.org/10.1016/S0921-3449(96)01165-2
Friedrich, W., & Greenberg, E. (1983). Glucose repression of luminescence and luciferase in Vibrio fischeri. Archives of microbiology, 134, 87-91. DOI: https://doi.org/10.1007/BF00407937
Futra, D., Heng, L. Y., Surif, S., Ahmad, A., & Ling, T. L. (2014). Microencapsulated Aliivibrio fischeri in alginate microspheres for monitoring heavy metal toxicity in environmental waters. Sensors, 14(12), 23248-23268. doi:10.3390/s141223248.
Girotti, S., Bolelli, L., Ferri, E., Carpené, E., & Isani, G. (2015). Bioindicators in enviromental monitoring: bioluminiscen bacteria, algae and honeybees. In International Conference on Environmental Science and Technology, Rhodes, Greece.
Gu, M. B., Mitchell, R. J., & Kim, B. C. (2004). Whole-cell-based biosensors for environmental biomonitoring and application. Biomanufacturing, 269-305. DOI: https://doi.org/10.1007/b13533
Halmi, M. I. E. (2016). Rapid ecotoxicological tests using bioassay systems-a review. Journal of Biochemistry, Microbiology and Biotechnology, 4(1), 29-37. DOI: https://doi.org/10.54987/jobimb.v4i1.286
Halmi, M. I. E., Jirangon, H., Johari, W. L. W., Abdul Rachman, A. R., Shukor, M. Y., & Syed, M. A. (2014). Comparison of Microtox and Xenoassay light as a near real time river monitoring assay for heavy metals. The Scientific World Journal, 2014. doi:https://doi.org/10.1155/2014/834202.
Halmi, M. I. E., Kassim, A., & Shukor, M. Y. (2019). Assessment of heavy metal toxicity using a luminescent bacterial test based on Photobacterium sp. strain MIE. Rendiconti Lincei.Scienze Fisiche e Naturali, 30(3), 589–601. DOI: https://doi.org/10.1007/s12210-019-00809-5
Iglesias-Rodríguez, M. V., Umaña-Castro, R., Garcia-Mesa, L., Ortiz-Guilarte, E., Núñez-Moreira, R., Álvarez-Valcárcel, C., & Lugioyo-Gallardo, G. M. (2020). Caracterización fenotípica y molecular, e influencia de medios de cultivo, en el crecimiento y emisión de luz de bacterias del litoral de La Habana, Cuba. Revista de Biología Tropical, 68(4), 1298-1310. DOI: https://doi.org/10.15517/rbt.v68i4.41269
ISO-11348-1:2007. Water quality - Determination of the inhibitory effect of water samples on the light emission of Vibrio fischeri (Luminescent bacteria test) - Part 1: Method using freshly prepared bacteria (ISO 11348-1:2007,IDT).
Jan, A. T., Azam, M., Choi, I., Ali, A., & Haq, Q. M. (2016). Analysis for the presence of determinants involved in the transport of mercury across bacterial membrane from polluted water bodies of India. brazilian journal of microbiology, 47, 55-62. doi:10.1016/j.bjm.2015.11.023.
Jiménez, M. G. (2015). Superficies de respuesta mediante un diseño central compuesto. Revista Varianza, 11, 31-36.
Lerch G (1977) La experimentación en las ciencias biológicas y agrícolas. Ed. Científico Técnica.
López Planes, R. (1988). Diseño estadístico de experimentos. Ed. Científico-Técnica.
Lopez-Roldan, R., Kazlauskaite, L., Ribo, J., Riva, M. C., González, S., & Cortina, J. L. (2012). Evaluation of an automated luminescent bacteria assay for in situ aquatic toxicity determination. Science of the total environment, 440, 307-313. DOI: https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2012.05.043
Mackenzie, E. L., Iwasaki, K., & Tsuji, Y. (2008). Intracellular iron transport and storage: from molecular mechanisms to health implications. Antioxidants & redox signaling, 10(6), 997-1030. doi:10.1089/ars.2007.1893
Mahendran, G., Savitha, T., Khalifa, A. Y., Sharma, A., & Sankaranarayanan, A. (2022). Evaluation of environment by microbial sensors. In Bioprospecting of Microbial Diversity (pp. 407-424). Elsevier. DOI: https://doi.org/10.1016/B978-0-323-90958-7.00010-8
Martín, A., Serrano, S., Santos, A., Marquina, D., & Vázquez, C. (2010). Bioluminiscencia bacteriana. Reduca (Biología), 3(5), 75-86.
Muneeswaran, T., Kalyanaraman, N., Vennila, T., Rajesh Kannan, M., & Ramakritinan, C. M. (2021). Rapid assessment of heavy metal toxicity using bioluminescent bacteria Photobacterium leiognathi strain GoMGm1. Environmental Monitoring and Assessment, 193, 1-18. DOI: https://doi.org/10.1007/s10661-021-08860-2
Nawaz, A., & Ahmed, N. (2011). Isolation and characterization of indigenous luminescent marine bacteria from Karachi coast. Academic Research International, 1(2), 74.
Park, J., Shin, K., Lee, H., Choi, S., Kim, G., Depuydt, S., De Saeger, J., Heynderickx, P.M., Wu, D., Asselman, J., Janssen, C., & Han, T. (2023). Evaluating ecotoxicological assays for comprehensive risk assessment of toxic metals present in industrial wastewaters in the Republic of Korea. Science of The Total Environment, 867, 161536. DOI: https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2023.161536
Parmar, P., Shukla, A., Goswami, D., Patel, B., & Saraf, M. (2020). Enhanced detection of heavy metals using Vibrio alginolyticus PBR1 by optimizing luminescence medium through statistical modeling. Environmental Sustainability, 3(4), 437-452. DOI: https://doi.org/10.1007/s42398-020-00134-w
Pérez, C., Oramas, J., Arcadio, E., Miranda, A., Roman, Y., & González, A (2019). Optimización del medio de cultivo y las condiciones de fermentación para la producción de un biofertilizante a base de Pseudomonas fluorescens. Biotecnología Vegetal, 19(2), 127-138.
Podgórska, B., Pazdro, K., & Węgrzyn, G. (2007). The use of the Vibrio harveyi luminescence mutagenicity assay as a rapid test for preliminary assessment of mutagenic pollution of marine sediments. Journal of applied genetics, 48, 409-412. DOI: https://doi.org/10.1007/BF03195241
Quinn, C. W., Cate, D. M., Miller-Lionberg, D. D., Reilly III, T., Volckens, J., & Henry, C. S. (2018). Solid-phase extraction coupled to a paper-based technique for trace copper detection in drinking water. Environmental science & technology, 52(6), 3567-3573. DOI: https://doi.org/10.1021/acs.est.7b05436
Ramesh, C., Mohanraju, R., Karthick, P., & Narayana, S. (2014). Impact of light, temperature, salinity and glycerol on the intensity of luminescence and growth of marine bioluminescent bacteria Vibrio campbellii (strain STF1). Current Science, 511-513.
Scheerer, S., Gomez, F., & Lloyd, D. (2006). Bioluminescence of Vibrio fischeri in continuous culture: Optimal conditions for stability and intensity of photoemission. Journal of Microbiological Methods, 67(2), 321-329. DOI: https://doi.org/10.1016/j.mimet.2006.04.010
Shanware, A., Thakre, N., & Pande, S. (2013). Isolation and characterization of novel marine luminescent bacteria from Diu beach, India. Journal of Pharmacy Research 7(2013) 529-533. doi.org/10.1016/j.jopr.2013.05.019
Srivastava, V. S., & MacLeod, R. A. (1971). Nutritional requirements of some marine luminous bacteria. Canadian Journal of Microbiology, 17(5), 703-711. DOI: https://doi.org/10.1139/m71-113
Stuart, M., Lugioyo, M., & Álvarez, C. (1999). Atenuación de la luminiscencia de una cepa de Photobacterium leiognathi, aislada de aguas cubanas, por acción de xenobióticos y muestras ambientales. Contribution to Education and environmental protection, 0, 32-35.
Veysi, S., & Zeinoddini, M. (2023). Optimized Detection of Water and Food Toxin Contamination Using Vibrio persian Bioluminescence Inhibition Assay (VPBIA). Journal of Water Chemistry and Technology, 45(6), 564-573. doi.org/10.3103/S1063455X23060073
Villaescusa, I., Marti, S., Matas, C., Martine, M., & Ribó, J. M. (1997). Chromium (VI) toxicity to luminescent bacteria. Environmental Toxicology and Chemistry: An International Journal, 16(5), 871-874. DOI: https://doi.org/10.1002/etc.5620160506
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