Desarrollo y caracterización de películas de fibroina de seda para reparación condral

Development and characterization of silk fibroin films for condral reparation

La fibroína  de seda es una proteína  que ha demostrado ser un biomaterial con gran potencial en medicina  regenerativa, por  suscaracterísticas de biocompatibilidad y su amplia posibilidad de modificación estructural permite ser usada como andamio favore-ciendo procesos de crecimiento, diferenciación celular y la regeneración del tejido afectado.En este estudio se utilizaron capullos de gusano de seda Bombyx moriL., para la fabricación de películas de fibroína, los capullos fueron desgomados utilizando Na2CO30,02M, la fibroína obtenida se disolvió con LiBr 9,3M, el cual fue eliminado mediante diáli-sis y finalmente la solución de fibroína fue concentrada mediante contradiálisis. La fibroína fue servida en cajas de poliestireno, se-cadas a 90°C/24 horas y esterilizadas con etanol al 70%. Células madre mesenquimales fueron sembradas sobre estas películas de fibroína e inducidas a diferenciación utilizando un medio condrogénico especifico. La diferenciación fue evaluada por triplicadoa los 14 y 21 días mediante extracción de ARN total, síntesis de ADN copia y amplificación por PCR de un grupo de genes específi-cos de cartílago empleando cebadores específicos.Se fabricaron películas de fibroína estables y resistentes que permitieron el crecimiento y la multiplicación celular, así como la dife-renciación condrogénica evidenciada por la expresión de genes condrogenicos, no se afectó la viabilidad ni el recuento celular, las células  interactuaron  con el  andamio  evidenciado  por  el  área  de  tapizado  formado  sobre  la  superficie  de  la  película  de  fibroína.Finalmente se concluye que la fibroína de seda es un biomaterial que puede servir de andamio potencial para la regeneración de lesiones articulares.

Silk fibroin is a protein that has been shown to be a biomaterial with great potential in regenerative medicine, due to its biocompati-bility characteristics and its wide possibility of structural modification can be used as scaffold, favoring growth processes, cell differ-entiation and the regeneration of affected tissue. Bombix moriL. silkworm cocoons were used to make fibroin films, the silk fibroin were  degummed  using  0.02M  Na2CO3,  the  obtained  fibroin  was  dissolved with  9.3M  LiBr,  which  was eliminated  by  dialysis  and finally the fibroin solution was concentrated to 17% by counterdialysis. The fibroin was served in polystyrene boxes, dried at 90°C/24 hours and sterilized with 70% ethanol. The mesenchymal stem cells were seeded on fibroin films and induced differentiation using a specific chondrogenic medium. Differentiation was assessed in triplicate at 14 and 21 days by total RNA extraction, DNA synthesis copy and PCR amplification of a group of cartilage-specific genes using specific primers. Stable and resistant fibroinfilms that allowed cell growth and multiplication were fabricated, as well as the chondrogenic differentiation evidenced by the expression of chondrogenic genes, the viability and the cell count were not affected, the cells interacted with the scaffolding evidenced by the area of upholstery formed on the surface of the fibroin film. Finally, it is concluded that silk fibroin is a biomaterial that can serve as a potential scaffold for the regeneration of joint injuries.