Aislamiento de cepas nativas microbianas con actividad celulolítica óe un proceso de compostaje
Palabras clave:
compostaje, microorganismos celulolíticos, endoglucanasas, rojo congo (es)composting, microorganisms cellulolytic, endoglucanases, red congo (en)
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El aislamiento, selección, adaptación y manipulación de microorganismos nativos, procedentes de desperdicios orgánicos, es una alternativa para evitar la acumulación y desaprovechamiento de estos materiales indeseables, porque sirven como fuente de obtención de cepas microbianas potencialmente productoras de enzimas industriales y/o a su vez como sustrato, para que estos mismos organismos puedan transformarlos en compost o abono orgánico. En el presente trabajo se aislaron, purificaron y evaluaron 39 cepas nativas de microoganismos con potencial actividad celulolítica, a partir de desechos orgánicos del sector urbano y rural, procedentes de la Planta de Compostaje del municipio de Marinilla, Antioquia. Ellos fueron previamente seleccionados y posteriormente sometidos a una degradación aerobia o compostaje.
Las cepas microbianas se aislaron en un medio selectivo con carboximetilcelulosa (CMC), de las fases mesófila, termófila, enfriamiento y maduración del proceso de compostación. El 82% de las colonias obtenidas fueron identificadas tentativamente como Bacillus por su morfología y por su reacción a la coloración de Gram. La población fúngica únicamente se evidenció durante la fase de enfriamiento. Posteriormente se procedió a evaluar de forma cualitativa, la potencial actividad celulolítica en medio sólido a través de la coloración con rojo Congo, con el que se evalúo la actividad p-endoglucanasa a través de la formación de zonas clarificadas. Dicha tinción se hizo en dos medios con CMC con y sin glucosa. Se observó que el 33.3% de los organismos aislados produjeron la enzima en ambos medios, sin embargo el 25.6% de los microorganismos, no evidenciaron la producción de ésta enzima, y sólo el 15.8% no requirieron el inductor para producirla.
The isolation, selection, adaptation and handling of native microorganisms, coming from organic waste, is an alternative to avoid the accumulation and the lack of the proper use of these undesirable materials. This organic waste is a source for obtaining microbial strains which are potentially producers of industrial enzymes and, at the same time, it works as substrate so that these organisms can transform it into compost or organic manure. In this work, 39 native strains of microorganisms with potential cellulolytic activity, coming from the organic waste of the urban and rural sector, from the Compostage Plant of Marinilla (Antioquia) municipality, were isolated, evaluated and purified. The waste was previously selected and then submitted to an aerobic degradation or compostage.
The microbial strains were isolated in a selective medium with carboxymethyl cellulose (CMC), of the phases mesophile, tenmophile, cooling and maturation of the compost process. Eighty-two percent (82%) of the obtained colonies were identified, in principle, as Bacillus, because of their morphology and their reaction to the Gram coloration. The fungi population was seen only during the cooling phase. Then, the potential cellulolytic activity was evaluated qualitatively in a solid medium with the Congo Red coloration, with which the íí-endoglucanase activity was evaluated through the formation of clarified zones. Such staining was applied in two mediums with CMC with and without glucose. It was observed that 33.3% of the isolated organisms produced the enzyme in both mediums; however, 25.6% of microorganisms did not show the production of this enzyme, and only 15.8% did not require the inducer to produce it.
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