Detección de las infecciones congénitas y persistentes por el virus de la peste porcina clásica

Se estudió mediante la técnica de RT-PCR anidada, las infecciones virales persistentes y congénitas causadas por el virus de la Peste Porcina Clásica (PPC) en muestras de tejidos de casos positivos de campo, tonsilas de cerdas gestantes descartadas con sus respectivas camadas y tonsilas de cerdas de descarte. Para la detección del ácido nucleico se emplearon oligonucleotidos para el gen de la glicoproteína E2, los cuales amplifican un fragmento de 270 pares de bases. A continuación, los amplificados fueron analizados mediante la técnica de RFLPs utilizando las enzimas de restricción Avall, Bañil y PvuII y se clasificaron antigenicamente las muestras positivas con un panel de anticuerpos monoclonales marcados con peroxidasa. Se logró la amplificación del fragmento del gen de la glicoproteína E2 en 14 casos de campo de los 20 analizados. De igual modo, se obtuvo la amplificación en ocho muestras de tonsilas de cerdas, de las cuales seis amplificados pertenecían a las tonsilas obtenidas de las cerdas gestantes y dos de las tonsilas de cerdas de descarte. Al analizarse los casos positivos por RT-PCR
anidada con el panel de anticuerpos monoclonales, estos fueron clasificados como cepas de campo. Mediante el análisis de los amplificados con las enzimas de restricción, se logro agrupar con la enzima Avall los amplificados en el grupo 4 y con la enzima PvuII en el grupo 1; mientras que con la enzima Bañil, hubo digestión parcial o nula de los productos de amplificación, lo que imposibilitó el agrupamiento de estos, a los patrones establecidos por esta enzima.

Persistent infections and congenital disease caused by Classical Swine Fever Virus (CSFV) were studied using RT-nested PCR. For this purpose, tissues samples collected from positive field cases, tonsils from discarded gestating sows with their litter and other tonsils also from discarded sows were examined. In order to detect the viral nucleic acid a set of oligonucleotides primers directed to E2 gene were used to amplify a fragment of 270pb. Then, those amplified were cut with restriction enzymes to generate RFLP’s. Positives samples were antigenically studied by using monoclonal antibodies conjugates with peroxidase. The fragment belonged to E2 gene was amplified in 14 out of 20 field cases analyzed. Similarly, the viral genome was also detected in 8 tonsils sows samples, 6 of which belonged to gestating sows and the other 2 to discarded sows. The positive samples by RT-PCR were classified as field strains by monoclonal antibody. The PCR amplified were grouped within group 4 using the Avall enzyme and within group 1 by digestión with enzyme PvuII. It noticed a partial digestión when using BanII enzyme. The epidemiológical significance of these findings is discussed.