Evaluación de la toxicidad de proteínas de Bacillus thuringiensis Berliner hacia el gusano blanco de la papa Premnotrypes Vorax Hustache

Bacillus thuringiensis Berliner proteins toxicity evaluation against andean Po tato Weevil Premnotrypes Vorax Hustache

El presente estudio estableció una metodología de bioensayo para determinar la actividad tóxica que las proteínas patrón Cry3Aa, Cry3Ba, Cry3Bb, Cry3Ca y Cry7Aa de B. thuringiensis pudieran tener sobre larvas del gusano blanco de la papa Premnotrypes vorax Hustache, plaga de gran importancia en las diferentes zonas productoras de papa en Colombia. Los bioensayos fueron realizados empleando papa como sustrato alimenticio en forma de tubérculos o como puré y las proteínas mencionadas se emplearon en forma de
suspensión espora-cristal, solubilizadas y/o procesadas
enzimáticamente. La metodología de bioensayo más adecuada consistió en cubos de tubérculos de papa impregnados superficialmente con las proteínas de B. thuringiensis. Aunque se observó una ligera mayor actividad de las proteínas Cry3Aa y Cry3Ca esta no superó el 10%. No se obtuvo actividad tóxica de ninguna de las proteínas evaluadas cuando fueron procesadas con la enzima tripsina o solubilizadas a un pH de 4.1. Los resultados indicaron que las proteínas Cry de Bt empleadas no presentan actividad tóxica significativa sobre larvas de P Vorax. Se plantea la hipótesis que esto es debido a que las proteínas provienen de cepas
aisladas en otras regiones del mundo; por 10 tanto, nuevos
estudios al respecto deberán evaluar proteínas producidas
por cepas nativas aisladas de áreas de cultivo donde P vorax se presente como plaga de forma natural.

The present work stablished a bioassay methodology in order to determine B. thuringiensis Cry3Aa, Cry3Ba, Cry3Bb, Cry3Ca and Cry7 Aa standard proteins toxicity against Andean potato weevil (Premnotrypes vorax Hustache). This insect is a very important pest in almost all potato fields in Colombia. Bioassays were done using natural diet as potato tuber pieces or potatoe flour. Proteins were used as crystals, solubilized or enzimatically processed. Best bioassay used potato pieces superficially contaminated with the respective B. thuringiensis proteins. Although sorne toxicity were observed with Cry3Aa and Cry3Ca proteins, mortality never was over 10%. AH proteins were no toxic when tripsinated or solubilized at 4.1 pH. We concluded that Cry proteins eva1uated have no toxicity against P. vorax 1arvae. We hypothesized it could be due to its foreing origin, so further studies should involve evaluation of proteins produced by native strains isolated from potato fields where P. vorax is naturally present.