Application of High-Performance Liquid Chromatography with Diode-Array Detection (HPLC-DAD) for the Determination of Sulfadiazine and Sulfadoxine in Serum

Aplicación de la cromatografía líquida de alto rendimiento con detección de matriz de diodos (HPLC-DAD) para la determinación de sulfadiazina y sulfadoxina en suero

Introduction. Monitoring serum drug levels in children with congenital toxoplasmosis is essential for determining therapeutic efficacy. This study aimed to standardize the quantification of two sulfonamides, sulfadiazine (SDZ) and sulfadoxine (SDX), using high-performance liquid chromatography coupled with a diode array detector (HPLC-DAD). Key attributes such as linearity, precision, accuracy, selectivity, limit of detection (LOD), and limit of quantification (LOQ) were evaluated, alongside secondary attributes like drug stability and matrix effects. Methodology. The quantification of SDZ and SDX was performed using HPLC-DAD, evaluating: linearity: Confirmed a linear correlation between analytical signal and drug concentration, precision: Evaluated using relative standard deviation (%RSD), accuracy: Determined by recovery percentages, selectivity: Ensured no significant interference from the biological matrix, LOD and LOQ: Assessed for method sensitivity. Results. The method demonstrated a clear linear relationship between concentration and instrumental response. Precision was within acceptable ranges for bioanalytical studies, with %RSD indicating consistent results. The accuracy was satisfactory with recovery percentages slightly below 90%, which was acceptable considering the complexity of the biological matrix. LOD and LOQ were consistent with previously reported values, confirming high sensitivity. Conclusions. The HPLC-DAD method is reliable, robust, and sensitive for monitoring sulfadiazine and sulfadoxine levels in serum. While recovery percentages were slightly below 90%, the method’s performance was satisfactory considering the biological matrix. This method is suitable for therapeutic monitoring and can aid in assessing treatment efficacy in congenital toxoplasmosis.

Introducción. La monitorización de los niveles séricos de fármacos en niños con toxoplasmosis congénita es esencial para determinar la eficacia terapéutica. El objetivo de este estudio fue estandarizar la cuantificación de dos sulfonamidas, sulfadiazina (SDZ) y sulfadoxina (SDX), mediante cromatografía líquida de alta resolución acoplada a un detector de matriz de diodos (HPLC-DAD). Se evaluaron atributos clave como la linealidad, la precisión, la exactitud, la selectividad, el límite de detección (LOD) y el límite de cuantificación (LOQ), junto con atributos secundarios como la estabilidad del fármaco y los efectos de la matriz. Metodología. La cuantificación de SDZ y SDX se realizó mediante HPLC-DAD, evaluando: linealidad: Se confirmó una correlación lineal entre la señal analítica y la concentración del fármaco, precisión: Evaluada mediante la desviación estándar relativa (%RSD), exactitud: Determinada por los porcentajes de recuperación, selectividad: Se garantizó que no hubiera interferencias significativas de la matriz biológica, LOD y LOQ: Se evaluó la sensibilidad del método. Resultados. El método demostró una clara relación lineal entre la concentración y la respuesta instrumental. La precisión estuvo dentro de rangos aceptables para estudios bioanalíticos, con %RSD indicando resultados consistentes. La exactitud fue satisfactoria, con porcentajes de recuperación ligeramente inferiores al 90%, lo que resultó aceptable teniendo en cuenta la complejidad de la matriz biológica. El LOD y el LOQ fueron coherentes con los valores comunicados anteriormente, lo que confirma la alta sensibilidad. Conclusiones. El método HPLC-DAD es fiable, robusto y sensible para monitorizar los niveles de sulfadiazina y sulfadoxina en suero. Aunque los porcentajes de recuperación fueron ligeramente inferiores al 90%, el rendimiento del método fue satisfactorio teniendo en cuenta la matriz biológica. Este método es adecuado para la monitorización terapéutica y puede ayudar a evaluar la eficacia del tratamiento en la toxoplasmosis congénita.

Introdução. A monitorização dos níveis séricos dos medicamentos em crianças com toxoplasmose congénita é essencial para determinar a eficácia terapêutica. O objetivo deste estudo foi normalizar a quantificação de duas sulfonamidas, a sulfadiazina (SDZ) e a sulfadoxina (SDX), por cromatografia líquida de alta resolução acoplada a um detetor de díodos (HPLC-DAD). Foram avaliados atributos-chave como a linearidade, a precisão, a exatidão, a seletividade, o limite de deteção (LOD) e o limite de quantificação (LOQ), bem como atributos secundários como a estabilidade do fármaco e os efeitos da matriz. Metodologia. A quantificação de SDZ e SDX foi efectuada por HPLC-DAD, avaliando: linearidade: foi confirmada uma correlação linear entre o sinal analítico e a concentração do fármaco, precisão: avaliada pelo desvio-padrão relativo (%RSD), exatidão: determinada pelas taxas de recuperação, seletividade: foi assegurada a ausência de interferências significativas da matriz biológica, LOD e LOQ: foi avaliada a sensibilidade do método. Resultados. O método demonstrou uma relação linear clara entre a concentração e a resposta instrumental. A precisão situou-se dentro de intervalos aceitáveis para estudos bioanalíticos, com %RSD a indicar resultados consistentes. A exatidão foi satisfatória, com percentagens de recuperação ligeiramente inferiores a 90%, o que foi aceitável tendo em conta a complexidade da matriz biológica. O LOD e o LOQ foram consistentes com os valores previamente comunicados, confirmando a elevada sensibilidade. Conclusões. O método HPLC-DAD é fiável, robusto e sensível para monitorizar os níveis séricos de sulfadiazina e sulfadoxina. Embora as taxas de recuperação tenham sido ligeiramente inferiores a 90%, o desempenho do método foi satisfatório, tendo em conta a matriz biológica. Este método é adequado para a monitorização terapêutica e pode ajudar a avaliar a eficácia do tratamento na toxoplasmose congénita.Palavras-chave: RP-HPLC-DAD, sulfadoxina, sulfadiazina, toxoplasmose.