Estudio in vitro de las propiedades de alopurinol y su actividad foto-oxidante

In vitro studies of the dual properties of Allopurinol anti- and photo-oxidants Mechanisms

Se estudió la habilidad del alopurinol (1) para inhibir radicales libres o especies reactivas de oxigeno (.OH, ¹O₂, H₂O₂), igualmente se determinó su actividad fotoquímica. De otro lado se midió la habilidad de 1 para eliminar los metabolitos de oxígeno generados por un sistema libre de células basado en quimioluminicencia aumentada de luminol y se monitoreo el espectro de absorción electrónica. Las dos determinaciones, absorbancia y fluorescencia, revelan que 1 es capaz de reaccionar con cantidades equimoleculares de H₂O₂. En presencia de alopurinol se observan periodos de inhibición dosis dependiente al usar isoluminol como intensificador de luminiscencia (ILCL) en presencia de peroxidasa de rábano o ión ferroso. Por otro lado, 1 no mostró una eficiente actividad frente a radicales galvanoxil en solución etanólica. En otros experimentos en presencia de 1 no se observó bloqueo de especies de oxígeno singlete (¹O₂) generado por rosa bengala. La habilidad de 1 fue comparada con la de vitaminas E y C. En experimentos de fotohemólisis in vitro en presencia de 1 y cinoxacin, quinolona fototóxico antibanterial, el efecto fotohemolítico del cinoxacin fue disminuido. El alopurinol no mostró efecto fototóxico por irradiación con luz UV-A o luz visible, sin embargo se mostró foto - inestable y fototóxico in vitro bajo irradiación con luz UV-B.

The objective of this study was to investigate the ability of allopurinol (1) to inhibit free radical or reactive oxygen species (.OH, ¹O₂, H₂O₂) as well as the study of its photochemical activity. We investigated the ability of 1 to scavenge oxygen metabolites generated by cell-free systems using luminol enhanced-chemiluminescence and electronic absorption spectra as monitors. Both absorbance and fluorescence scans reveal that 1 is able to react with equimolar quantities of H₂O₂. In the presence of 1 a dose-dependent inhibition period was observed in this system as assayed by isoluminol-enhanced chemiluminescence (ILCL) in the presence of horseradish peroxidase (HRP), as well as by luminol-enhanced chemiluminescence (LCL) in the presence of H₂O₂ or ferrous ion. On the other hand, 1 did not show an efficient scavenging activity of galvanoxyl radical in ethanolic solutions. Furthermore, in a separate experiment, it was not observed trapping of singlet oxygen (¹O₂) generated by Rose Bengal, in the presence of 1. The activity of 1 was compared with that of vitamins E and C. In vitro experiments of photohemolysis in presence of 1 and cinoxacin, a phototoxic antibacterial quinolone, the photohemolytic effect of cinoxacin was diminished. Allopurinol alone did not show any phototoxic effect under irradiation with UV-A or visible light but was photo-unstable and phototoxic in vitro with UV-B light.