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Regeneración de brotes a partir de tejido transformado en (Phaseolus vulgaris) Fabaceae cultivares 'ICA Pijao' y 'BAT 93'
Regeneration of shoots from transformed tissue in (Phaseolus vulgaris) Fabaceae cultivars 'ICA Pijao' and 'BAT 93'
DOI:
https://doi.org/10.15446/abc.v27n2.86304Palabras clave:
co-cultivo, explante, infiltración, selección. (es)co-culture, explant, infiltration, selection (en)
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El cultivo de Phaseolus vulgaris L. se encuentra muy difundido en el mundo. La transformación genética vía Agrobacterium tumefaciens constituye una alternativa en esta especie para la obtención de cultivares con tolerancia o resistencia a condiciones ambientales desfavorables. Sin embargo, la condición cultivar dependiente y la baja regeneración del tejido transformado en los protocolos establecidos para P. vulgaris, han limitado el empleo de esta tecnología a un grupo reducido de cultivares. El objetivo de este trabajo fue regenerar brotes a partir de tejido transformado en P. vulgaris cv. 'ICA Pijao’ y 'BAT 93’. Se determinó el efecto de la concentración de la suspensión bacteriana, la infiltración por vacío, el periodo de co-cultivo sobre la regeneración de brotes. Además, se determinó la efectividad de la geneticina y el glufosinato de amonio durante la etapa de selección en la regeneración de brotes a partir de explantes inoculados con A. tumefaciens. Los explantes ½ NC-1 inoculados con una suspensión bacteriana ajustada a una densidad óptica de 0,1, sin infiltración con vacío y mantenidos por tres días en co-cultivo presentaron la mejor respuesta de regeneración. La geneticina y el glufosinato de amonio fueron efectivos para la selección de brotes. La regeneración de brotes a partir de tejido transformado vía A. tumefaciens en P. vulgaris cv. 'ICA Pijao' y 'BAT 93', no descrita en la literatura científica, resulta importante para su posterior aplicación en programas de mejoramiento genéticos de esta especie.
The cultivation of Phaseolus vulgaris L. is very widespread in the world. The genetic transformation via Agrobacterium tumefaciens, is an alternative in this species to obtain cultivars with tolerance or resistance to adverse environmental conditions. However, the dependent cultivation condition and the low regeneration of the transformed tissue in the protocols established for P. vulgaris, have limited the use of this technology to a small group of cultivars. The aim of this work was to regenerate shoots from transformed tissue in P. vulgaris cv. 'ICA Pijao' and 'BAT 93'. The effect of the concentration of the bacterial suspension, the infiltration by vacuum, the period of co-cultivation on the regeneration of shoots was determined. In addition, the effectiveness of geneticin and glufosinate-ammonium was determined during the selection stage in the regeneration of shoots from explants inoculated with A. tumefaciens. The explants ½ NC-1 inoculated with a bacterial suspension adjusted to an optical density of 0.1, without infiltration with vacuum and maintained for three days in co-culture presented the best regeneration response. Geneticin and glufosinate ammonium were effective in the selection of shoots. The regeneration of shoots from transformed tissue by A. tumefaciens in P. vulgaris cv. 'ICA Pijao' and 'BAT 93', not described in the scientific literature, is important for its subsequent application in breeding programs of this species.
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