Separación rápida de leucocitos de sangre periférica

La obtención rápida de leucocitos de sangre periférica ha sido posible gracias al desafío y construcción de una cámara receptora (esterilizable químicamente). Inmediatamente se ha tomado la muestra de sangre anti-coagulada (3 ml) con una jeringa plástica, esta se acopla a la cámara receptora previamente llena de ficoll-hypaque. Durante la centrifugación los eritrocitos pasan lenta y gradualmente a la cámara receptora y los leucocitos que dan en la jeringa en la zona de exclusión o interface (plasma/ficoll-hypaque). La obtención de los PBL se realiza desacoplando la jeringa de la cámara para proseguir el lavado y purificación de las células por separado, ahorrando tiempo y reduciendo en lo posible el contacto de los leucocitos con superficies adherentes o posibilidades de contaminación. EI desafío de esta nueva cámara permite obtener leucocitos sin contaminación eritrocitaria y economiza tiempo para el procesamiento de muestras sanguíneas.

Periferal Blood Leucocites, PBL, can be easily separated

from Red Blood Cells (RBC), using a ficoll-hypaque

density gradient. A three ml plastic syringe with 3

ml of anticoagulated peri feral blood is readely attached

to the sterilized cell chamber full of a density gradient

solition. This device thus assembled is centrifuged,

(500 - 2.500

rpm), for 20 minutes and the RBC are

readely separated. PBLs retained at the plasma/ficollhypaque

interphase in the plastic syringe are isolated

following standard protocols and used for clinical or

biological test (HLA, microcitotoxic technique ,etc.).

Details of the cell chamber are given. This procedure

yields optimun PBL without other cell contaminants

and can save time in skilfull hands.